Автореферат канд

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время в целом ряде регионов России наблюдается ухудшение экологической ситуации, обусловленное действием различных природных, техногенных, ятрогенных (самолечение) и социальных факторов, что зачастую сопровождается развитием хронических стрессовых состояний и кишечных дисбактериозов, которые могут быть причинами поступления в общий кровоток избытка кишечного эндотоксина (ЭТ) и патоморфоза заболеваний, стертости их клинической картины, и, как следствие, появления так называемых «неясных состояний». «Неясные состояния» - это комплекс различных жалоб пациента, которые могут быть отнесены к симптомам многих заболеваний, носить постоянный или преходящий характер, сопровождаться дискомфортом и прогрессирующим ухудшением самочувствия, а также отсутствием каких-либо патологических изменений в общеклинических анализах и иных традиционных методах обследования. Мы полагаем, что важную роль в патогенезе этих трудно выявляемых заболеваний может играть ЭТ кишечной микрофлоры.

ЭТ - это липопополисахарид (ЛПС), который является обязательным компонентом внешней мембраны грамотрицательных (Гр") бактерий. ЭТ может взаимодействовать с различными клетками тела человека, вызывать их повреждение или активировать их функции, стимулировать продукцию цитокинов и других биологически активных соединений. В частности, в фармакологических концентрациях ЛПС (пирогенал, продигиозан, др.) достаточно эффективно используется для лечения хронических воспалительных гинекологических заболеваний. При высоких дозах (концентрациях) ЛПС может вызывать диссеминированное внутрисосудистое свертывание, развитие острой или хронической органопатологии и эндотоксинового шока (острой полиорганной недостаточности).

Кишечник, в частности, толстая кишка, содержит обычно большое количество Гр бактерий. Их эндотоксин проникает в системный кровоток в физиологических условиях лишь в незначительных количествах, обеспечивающих умеренную активацию ряда систем макроорганизма. Однако при стрессах, различных заболеваниях и дисбактериозах ситуация существенно меняется, и проникновение эндотоксина в кровоток значительно увеличивается (М.Ю.Яковлев 1988,1993; В.Г.Лиходед и др., 1996). В организме человека имеется ряд клеточных и гуморальных факторов антиэндотоксиновогo иммунитета, например, нейтрализующие эндотоксин антитела, клетки Купфера, макрофаги и полиморфноядерные лейкоциты (ПЯЛ). Активность этих факторов определяет устойчивость к эндотоксину и предупреждает развитие патологических процессов, обусловленных так называемой «эндотоксиновой агрессией (М.Yakоvlеv 2000). Недавно проведенныe исследования показали, что целый ряд инфекционных и неинфекционных заболеваний и патологических состояний характеризуется резким снижением антиэндотоксинового иммунитета, причем при излечении показатели антиэндотоксинового иммунитета восстанавливаются (М.Ю.Яковлев и др.,1998; В.Г.Лиходед и др., 1999).

Учитывая имеющиеся в настоящее время материалы, мы сделали предположение о том, что активность факторов антиэндотоксинового иммунитета можно рассматривать в качестве интегрального показателя, характеризующего состояние здоровья человека.

Цель работы - изучить возможность использования показателей гуморального иммунитета к эндотоксину Гр бактерий для выявления групп риска по возникновению каких-либо заболеваний при диспансеризации населения, выбора алгоритма диагностического обследования и оценки эффективности лечения заболеваний различной этиологии.

Задачи исследований:

1. Разработать иммуноферментный способ оценки гуморального иммунитeтa к эндотоксину Гр бактерий по показателям содержания антител к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС Е.соli О14 с общим энтеробактериальным антигеном (ОАЭ).

2. Провести обследования сотрудников предприятий, различающихся по условиям производства и определить возможность разделения обследуемых по группам в соответствии с показателями гуморального антиэндотоксинового иммунитета.

3. Провести лабораторные и клинические обследования пациентов, выделенных в группы по показателям гуморального антиэндотоксинового иммунитета, выявить наличие у них какой-либо патологии и оценить возможность использования показателей иммунитета для оценки состояния здоровья и формирования групп риска по возникновению определенных заболеваний.

4. Изучить изменения показателей антиэндотоксинового иммунитета при выздоровлении и оценить возможность использования этих показателей для оценки эффективности терапии.

Научная новизна работы.

Установлено, что по значениям показателей гуморального иммунитета к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС Е.соli О14 (ОАЭ) обследованные лица могут быть разделены на 11 групп, из которых лишь одна характеризуется нормальными показателями антиэндотоксинового иммунитета.

На предприятиях с экологически неблагоприятными условиями труда у большинства обследованных показатели гуморального антиэндотоксинового иммунитета отклоняются от нормы в сторону снижения или повышения.

Группы пациентов с измененными показателями антиэндотоксинового иммунитета характеризуются относительным преобладанием определенных патологических процессов.

В группах обследованных с одновременным снижением или повышением обоих изученных показателей гуморального антиэндотоксинового иммунитета с высокой частотой выявляются хронические заболевания желудочно-кишечного тракта, острые пневмонии, вирусные инфекции. У лиц с резким одновременным повышением обоих изученных показателей обнаруживаются коллагенозы и злокачественные новообразования.

При выздоровлении показатели гуморального антиэндотоксинового иммунитета нормализуются.

Практическая ценность работы.

Разработан новый иммуноферментный способ оценки резистентности организма по показателям гуморального антиэндотоксинового иммунитета (СОИС - ИФА - способ оценки иммунного статуса). Патент РФ N 2011913, 1994.

Составлены методические рекомендации для сотрудников Клинико-Диагностического Общества по использованию показателей гуморального антиэндотоксинового иммунитета для выбора алгоритма диагностического обследования и оценки эффективности лечения пациентов. Метод внедрен в практику работы врачей Клинико-Диагностического Общества, где в течение последних двух лет с использованием этого метода обследовано 2500 пaциентов.

Положения, выдвинутыe на защиту.

Показатели гуморального иммунитета к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС

E.coli О14 (ОАЭ) могуг быть использованы:

1) для оценки состояния здоровья людей и выявления групп риска возможного возникновения заболеваний,

2) для выбора тактики диагностического обследования и лечения заболеваний различной этиологии,

3) для оценки эффективности терапии.

Апробация работы. Основные положения диссертации были доложены на l-ой Всесоюзной конференции по экстремальной патологии (Москва, 1991, ИМЧ АМН СССР), на 1-ом (Крым, 1992) и 2-ом (Москва,1993, ИМЧ РАМН) международных симпозиумах-семинарах "Фундаментальная наука и биотехнология - страховой медицине", на l-ой конференции, посвященной памяти профессора В.Н.Галанкина "Воспаление с позиций теории и практики" (Москва, 1998, РУДН), на VI конференции Международного эндотоксинового общества (Париж,2000, Институт Пастера), на заседании Ученого Совета Института общей и клинической патологии Клинико-Диагностического Общества (Москва, 2000,2001 гг.), на Всероссийской научной конференции по патологической анатомии, посвященной памяти профессоров И.К. Есиповой и В.Н. Галанкина (Москва, 2001, РУДН).

По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 83 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждение, выводы и список использованной литератуpы (117 источников отечественных и зарубежных авторов). Работа иллюcтрирована 2 рисунками и 9 таблицами.

СОБСТВЕННЫЕ ИСЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы. Обследовано 4440 взрослых людей, из них 2480 сотрудников экологически чистого производства и 1960 работающих на химическом производстве пластмасс. Больные с острыми заболеваниями в состав обследованных не входили. У всех обследованных бpaли венозную кровь и определяли содержание в сыворотке крови антител к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС Е.coli О14 (ОАЭ). Для оценки содержания антитeл применяли иммуноферментный способ, описанный в разделе "Результаты собственных исследований". Кроме того, проводили традиционные клинические анализы крови и мочи и в случае необходимости ультразвуковые исследования, электрокардиографию, гастрофиброскопию анализы на наличие альфафенопротеина, оценку aктивности гормонов, анализы на наличие некоторых инфекций и взятие проб испражнений для выявления дисбактериоза Клинические и лабораторные исследования были проведены, главным образом на базе Института общей и клинической патологии Клинико-Диагностического Общества в г. Москве. Микробиологические исследования на наличие дисбактериоза кишечника были проведены в лаборатории микробиологической диагностики Научно-производственного центра «Гидробиос» Федерального управления медико-биологических и экстремальных проб при МЗ РФ и в лаборатории микробиологии НИИ геронтологии МЗ РФ.

Для обследования пациентов в группах риска была разработана специальная анкета, учитывающая все перенесенные заболевания и любые минимальные жалобы пациента. К обследованиям при необходимости привлекались следующие специалисты: терапевт, кардиолог, пульмонолог, гастроэнтеролог, хирург, гинеколог, невропатолог, эндокринолог, уролог, онколог.

В работе использованы следующие препараты фирмы Sigma (США):

- гликолипида хемотипа Re, выделенный из бактерий Re-мутанта Salmonella Minnesota R595 путем экстракции хлороформом и метанолом,

- ЛПС Escherichia coli О55, выделенный водно-фенольным способом,

- ЛПС Escherichia coli О111, выделенный водно-фенольным способом,

- ЛПС Klebsiella pneumonia, выделенный водно-фенольным способом,

- ЛПС Salmonella enteritidis, выделенный водно-фенольным способом.

Кроме того использовали препараты, полученные из НПЦ «Гидробиос» (Москва):

- ЛПС О14 (ОАЭ), выделенный водно-фенольным способом из бактерий Escherichia coli О14 и содержащий общий антиген энтеробактерий в иммуногенной форме,

- ЛПС Proteus vulgaris, выделенный водно-фенольным способом,

- вакцина, полученная путем прогревания бактерий Salmonel1a minnesota R595 с гликолипидом хемотипа Re в течение 1 часа при 56°C,

- вакцина, полученная путем прогревания бактерий Escherichia соli О14 (ОАЭ) с общим антигеном энтеробактерий в течение 1 часа при 56°С.

Водорастворимый препарат Rе-гликолипида получали путем комплексирования с бычьим сывороточным альбумином фирмы Serva (USA) в среде с триэтиламином с последующей отгонкой триэтиламина на роторном испарителе, как описано в работе Ga1anos С. и др. (1997).

Для получения сывороток против Rе-гликолипида и ЛПС 014 иммунизировали кроликов породы Шиншилла весом 2,5 кг вакцинами из Sa1monel1a minnesota R595 и Escherichia соli О14 (ОАЭ). Протективную активность сывороток оценивали в опытах на белых беспородных мышах весом 16-18 грамм, которым внутрибрюшинно вводили различные ЛПС.

В иммуноэнзимных исследованиях применяли конъюгат протеина А штамма Staphylococcus aureus Cowan с пероксидазой хрена, полученный из НИИЭМ им.Гамалеи.

Для получения показателей нормы использовали пул сывороток 143 здоровых доноров в возрасте 28-30 лет, не имевших вредных привычек и хронических заболеваний в течение 3 месяцев.

При анализе результатов использовали общепринятые методы статистической обработки с привлечением критериев Стьюдента. Показатель Р менее 0,05 оценивали как значимый.

Результаты собственных исследований

Разработка способа оценки гуморального антиэндотоксинового иммунитета. Для оценки гуморального антиэндотоксинового иммунитета определяли антитела к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС E.coli О14 (ОАЭ). Выбор этих двух антигенов определялся следующими соображениями. Гликолипид хемотипа Re состоит из липида А и нескольких молекул кетодезоксиоктоната. Оба эти компонента входят в состав ЛПС большинства патогенных и условно патогенных грамотрицательных бактерий, в частности, энтеробактерий. Поэтому антитела к Rе-гликолипиду могут реагировать с эндотоксинами различных грамотрицательных бактерий. ЛПС Escherichia coli О14 (ОАЭ) содержит общий энтеробактериальный антиген, который связан с ЛПС большинства штаммов энтеробактерий. Поэтому антитела к ЛПС О14 (ОАЭ) могут нейтрализовать эндотоксины различных видов энтеробактерий. В связи с этим содержание антител к избранным двум антигенам может с определенной вероятностью характеризовать состояние гуморального антиэндотоксинового иммунитета.

Для проверки этого положения мы проверили протективную активность кроличьих сывороток против гликолипида хемотипа Re и против ЛПС E.coli О14 в опытах на белых беспородных мышах. Сыворотки защищали животных от гибели при внутрибрюшинном введении препаратов ЛПС, выделенных из E.coli О55 и О111, Кlebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis. Следовательно, антитела к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС О14 нейтрализуют эндотоксины различных энтеробактерий.

Препаратами Rе-гликолипида и ЛПС Е.соli О14 сенсибилизировали полистироловые планшеты для микротитрования. В лунки вносили по 250 мкл препарата в концентрации 1 мкг в 1 мл. Планшеты выдерживали 2 часа в термостате при 37°С и 18 часов при комнатной температуре, затем отмывали О,1М фосфатным буфером рН7 с 0,5% Твина и хранили в закрытом состоянии при 4°С.

Для определения содержания антител сыворотки крови обследованных разводили О,1М фосфатным буфером рН7,2 1:26 и вносили в лунки по 250 мкл. Исследования проводили в дубликатах. На каждом планшете для определения показателей нормы в две лунки вносили пул сывороток здоровых доноров. Планшеты инкубировали в течение 1 часа при 370С и промывали 5 раз тем же буфером с 0,5% Твина. Затем в лунки вносили по 150 мкл конъюгата белка А из штамма Staphylococcus aureus Cowan с пероксидазой хрена (производства НИИЭМ им.Гамалеи), инкубировали 1 час при 37°С и отмывали 5 раз тем же буфером с 0,5% Твина. Для определения количества коньюгата, связавшегося с антигеном, в лунки вносили смесь субстрата с хромогеном. Смесь готовили путем смешивания 200 мл 0,85% раствора NaCl, 2 мкл 33% раствора перекиси водорода и 200 мкл раствора ортофенилендиамина (100 мл ортофенилендиамина солянокислого и 1 мл этилового спирта). Планшеты выдерживали 30 минут при 37°С и останавливали реакцию путем добавления в каждую лунку по 50 мкл серной кислоты. Результаты учитывали фотометрически при длине волны 492 нм по интенсивности желтоватого окрашивания.

Этим способом с использованием одной серии сенсибилизированных плашек были сначала проверены сыворотки крови 143 здоровых доноров. Максимальные и минимальные показатели экстинкции при исследовании этих сывороток различались не более чем на 25%. Пул этих сывороток в дальнейшем был использован для получения показателей нормы.

При испытании сывороток крови обследованных людей отклонения от показателей нормы считали достоверными, если средние фотометрические показатели ферментной реакции в лунках с сывороткой обследованного значимо превышали или были значимо меньшими среднего фотометрического показателя в лунках с пулом сывороток крови доноров. При наличии значимых различий показатель t достоверности разницы между средними должен быть равным не менее 1,96. Расчет показателя t производили по формуле:

где t - показатель достоверности разницы между средними фотометрическими данными

х₁ - средний фотометрический показатель исследуемого образца,

Х₂ - средний фотометрический показатель пула сывороток доноров,

Е₁ - сумма квадратов отклонений фотометрических показателей в лунках с исследуемым образцом (X_i) от среднего фотометрического показателя исследуемого образца,

Е₂ - сумма квадратов отклонений фотометрических показателей в лунках с пулом сывороток доноров (х_у) от среднего фотометрического показателя этих сывороток.

Кроме того, в каждом случае определяли соотношение показателя содержания антител к ЛПС О14 (ОЭА) к показателю содержания антител к гликолипиду хемотипа Re.

Таким образом, для каждого обследованного определяли следующие

показатели: А1 - содержание антител к гликолипиду хемотипа Re, А2 содержание антител к ЛПС О14 (ОАЭ) и АЗ - отношение А2/А1. При обследовании 143 здоровых доноров были определены средние показатели нормы: А1 - 200 единиц экстинкции, А2 - 400 единиц и АЗ – 2/1.

Обследование сотрудников предприятий, различающихся по вредности производства.

Разработанный метод был сначала применен нами для обследования 152 сотрудников, прошедших очередную диспансеризацию и признанных практически здоровыми. Результаты обследования были весьма впечатляющими: работающие каждый день люди, не предъявляющие никаких жалоб на самочувствие, имели достаточно разные показатели антиэндотоксинового иммунитета и образовывали довольно большие группы (табл.1).

Таблица 1

Распределение по группам 152 обследованных, признанных при традиционной диспансеризации практически здоровыми

Кол-во пациентов	Показатели содержания антител
Кол-во пациентов	к Rе-гл.(А1)	к ЛПС 014 (А2)	А2/А1 (А3)
8	норма	норма	норма
73	норма	ниже нормы	ниже нормы
20	норма	выше нормы	выше нормы
9	ниже нормы	ниже нормы	норма
39	ниже нормы	выше нормы	выше нормы
3	выше нормы	выше нормы	выше нормы

Как видно из табл. 1, практически здоровые обследованные по показателям антиэндотоксинового иммунитета разделились на 6 групп, причем показатели нормы выявлены только у 8 (5,3%) обследованных. На этом этапе объяснить выявленные различия было довольно трудно. В связи с этим мы провели более обширные обследования на предприятиях, различающихся по условиям труда. Всего было обследовано 2480 сотрудников экологически чистых производств и 1960 работающих на химическом производстве. В большинстве случаев обследованные считали себя практически здоровыми. Больные с острыми заболеваниями в состав обследованных не входили.

По показателям гуморального антиэндотоксинового иммунитета обследованные были разделены на 11 групп (табл.2). При этом мы посчитали необходимым выделить отдельно 10 и 11 группы с очень высокими (увеличение на 300-600 ед.) или очень низкими (уменьшение на 150-250 ед.) показателями Аl и А2.

Количественное распределение сотрудников обследованныx предприятий по группам, показано в табл.3, из которой видно, что сотрудники двух обследованныx предприятий значительно различались по результатам деления на группы. На экологически чистом производстве большинство сотрудников было отнесено к 1-ой группе (28%) и ко 2-ой группе (40%). В то же время на химическом производстве к l-ой и 2-ой группам отнесено лишь 5% и 12% соответственно. Имеются также существенные различия в численности других групп, особенно в группах 5-ой,8-ой,- 9-ой, 10-ой и 11-ой.

Во всех группах были проведены дополнительныe лабораторныe и клинические обследования с привлечением специалистов различных профилей. Результаты этих обследований показали прежде всего, что среди 333 отнесенных к l-ой и 2-ой группам на химическом производстве лишь у одного человека (частота 0,003%) выявлены патологические процессы с поражением трех физиологических систем. Этот человек относился к групп.2.

Таблица 2

Показатели антиэндотоксинового иммунитета в группах

Группы	Показатели содержания антител
Группы	К Re-гликол. – А1	К ЛПС 014 – А2	A2/A1 – A3
1	Норма	Норма	Норма
2	Норма	Ниже нормы	Ниже нормы
3	Норма	Выше нормы	Выше нормы
4	Выше нормы	Норма	Ниже нормы
5	Выше нормы	Ниже нормы	Ниже нормы
6	Выше нормы	Выше нормы	Норма
7	Ниже нормы	Норма	Выше нормы
8	Ниже нормы	Ниже нормы	Норма
9	Ниже нормы	Выше нормы	Выше нормы
10	Резко выше нормы	Резко выше	Выше или ниже
11	Резко ниже нормы	Резко ниже нормы	Выше или ниже нормы

Среди 98 человек, отнесенных к 1-ой группе, то есть, группе с нормальными показателями антиэндотоксинового иммунитета, такие патологические процессы выявлены не были. В то же время среди 1627 лиц этого производства, отнесенных к группам 5, 8, 10 и 11, выявлен 91 человек с патологическими поражениями не менее трех физиологических систем (частота 0,56%).

Таблица 3

Распределение сотрудников обследованных предприятий по группам в соответствии с показателями содержания антител.

Груп-пы	Химическое производство		Экологически чистое производство
Груп-пы	Количество	%	Количество	%
1	98	5	694	28
2	235	12	992	40
3	0	0	25	1
4	0	0	24	1
5	745	38	26	1
6	0	0	50	2
7	0	0	26	1
8	392	20	24	1
9	0	0	446	18
10	78	4	0	0
11	412	21	173	7
Всего	1960	100	2480	100

Различия в частоте выявленных патологических процессов у лиц, отнесенных к разным группам, представлены в табл.4.

Таблица 4

Частоты патологических процессов в группах, выделенных по показателям антиэндотоксинового иммунитета

Патологические процессы	Частоты (%) поражений в группах
Патологические процессы	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
Доброкачественные опухоли		2	5	15	30	16				33	10
Хрон. заболевания ЖКТ		2	15		11		43	72	40	11	8
Патология эндокрин. системы			3		52				5	41	12
Мочеполовые инфекции			20	21		42	29		70		16
Острые пневмонии				15	3	90				27	11
Вирусные инфекции								60			65
Коллагенозы										10
Злокачест. новообразования										64
Туберкулез										5
Цирроз печени										5
Иерсиниоз										25
Заболевания неясной этиологии										25
Гепатит	2									71
Дисбактериоз	4	41	5	5	30	5	10	32	63	2	80

Из табл.4 видно, что в первой группе при нормальных показателях гyморального антиэндотоксинового иммунитета заболеваемость является относительно низкой. В других группах при измененных показателях антиэндотоксинового иммунитета различные заболевания встречаются значительно чаще. Так, в 5-ой группе преимущественно обнаруживались поражения эндокринных органов, в 6-ой группе - острые пневмонии и мочеполовые инфекции, в 7-ой группе - хронические поражения желудочно-кишечного тракта и мочеполовые инфекции, в 8-ой группе заболевания желудочно-кишечного тракта и вирусные инфекции, в 9-ой группе - гепатит, мочеполовые инфекции и заболевания желудочно-кишечного тракта, в 10-ой группе - патология эндокринной системы и дисбактериоз, злокачественные новообразования, острые пневмонии, коллагенозы, туберкулез и другие заболевания, в 11-ой - вирусные инфекции и дисбактериоз.

Особое внимание привлекают I0-ая и 11-ая группы, которые характеризуются резким повышением или снижением обоих показателей антиэндотоксинового иммунитета. Злокачественные новообразования, коллагенозы и туберкулез были выявлены лишь в 10-ой группе, в которой были обнаружены резко повышенные показатели антиэндотоксинового иммунитета. Перечень различных злокачественных образований в I0-ой группе приведен в табл.5.

Высокие титры антител к гликолипиду хемотипа Re при системной красной волчанке и ревматоидном артрите были описаны и ранее (В.Г.Лиходед и др., 1984). По-видимому, при коллагенозах имеется тесная связь между развивающимися патологическими процессами и титрами антигликолипидных антител. Однако, по нашим наблюдениям, при злокачественных образованиях очень высокие вначале титры антиэндотоксиновых антител по мере развития злокачественной опухоли заметно снижаются, и антиэндотоксиновый иммунитет затем практически полностью утрачивается.

Необходимо особенно подчеркнуть, что измененные показатели антиэндотокстиновогo иммунитета в 9-ой, 10-ой, 11-ой и в других группах были обнаружены раньше, чем были выявлены патологические процессы, в том числе такие серьезные, как меланома и другие злокачественные новообразования, коллагенозы и другие заболевания. Поэтому оценка состояния антиэндотоксинового гуморального иммунитета может дать ценные указания для своевременного выявления и лечения ряда заболеваний.

Таблица 5

Различные виды злокачественных образований, выявленных у обследованных в 10-й группе (78 человек)

Наименования патологических процессов	Количество больных
Рак мочеполовых органов	19
Рак молочной железы	18
Меланомы	5
Рак щитовидной железы	5
Рак поджелудочной железы	2
Глиома	1
ВСЕГО	50 (64%)

На химическом предприятии пациенты с выявленными нами заболеваниями наблюдались в течение трех лет. 128 человек были своевременно пролечены соответствующими методами, что привело к снижению смертности, снижению затрат на оплату инвалидности и временной нетрудоспособности. Кроме того, введение по нашим рекомендациям в рацион питания продуктов, содержащих бифидо- и лактобактерии, привело к стабилизации нормальной микрофлоры и снижению простудных заболеваний более чем на 30%.

Повторные обследования пациентов в разных группах показали, что в процессе излечения патологических процессов гуморальный антиэндотоксиновый иммунитет восстанавливался до показателей нормы.

Результаты изучения содержания антиэндотоксиновых антител и заболевамости в двух обследованных коллективах показывают, что показатели гуморального иммунитета к эндотоксину могут быть использованы для оценки состояния здоровья (резистентности) макроорганизма и предсказания возможности развития определенных патологических процессов. На основании полученных нами данных состояние резистентности можно оценивать следующим образом:

1) как нормальное физиологическое состояние - при нормальных значениях показателей А1, А2 и А3;

2) как вариант субкомпенсированного снижения резистентности с вероятностью развития дисбактериоза - при нормальном показателе А1 и снижении показателей А2 и А3;

3) как вариант субкомпенсированного снижения резистентности с повышением вероятности заболеваний желудочно-кишечного тракта, мочеполо-

вых инфекций и дисбактериоза - при нормальном значении показателя А1 и повышении показателей А2 и А3;

4) как вариант субкомпенсированного снижения резистентности с повышением вероятности развития пневмоний, мочеполовых инфекций и дисбактериоза- при повышении показателя А1, нормальном значении показателя А2 и снижении показателя А3;

5) как вариант декомпенсированного снижения резистентности с высокой вероятностью развития патологии эндокринной системы, заболеваний желудочно-кишечного тракта и дисбактериоза - при повышении показателя А1 и снижении показателей А2 и А3;

6) как вариант декомпенсироваанного снижения резистентности с высокой вероятностью развития острых пневмоний, мочеполовых инфекций и дисбактериоза - при повышении показателей А1 и А2 и нормальном значении показателя А3;

7) как вариант декомпенсированного снижения резистентности с высокой вероятностью развития мочеполовых инфекций, заболеваний желудочно-кишечного тракта и дисбактериоза - при понижении показателя А1 и повышении показателей А2 и А3;

8) как вариант декомпенсированного снижения резистентности с высокой вероятностью развития заболеваний желудочно-кишечного тракта, вирусных инфекций и дисбактериоза - при снижении показателей А1 и А2 и нормальном значении показателя А3;

9) как вариант декомпенсированного снижения резистентности с высокой вероятностью развития мочеполовых инфекций, патологии желудочно-кишечного тракта и дисбактериоза - при снижении показателя А1, нормальном значении показателя А2 и повышении показателя А3;

10) как вариант декомпенсированного дисбалансированного снижения резистентности с повышенной вероятностью развития онкологической патологии, коллагенозов, патологии эндокринной системы, острых пневмоний, заболеваний желедочно-кишечного тракта, цирроза печени, туберкулеза и дисбактериоза - при резком повышении (на 300-600 ед.) показателей А1 и А2 и повышении или понижении показателя А3;

11) как вариант декомпенсированного дисбалансированного снижения резистентности с высокой вероятностью развития вирусных инфекций, мочеполовых инфекций, острых пневмоний, патологии эндокринной системы, заболеваний жэелудочно-кишечного тракта и дисбактериоза - при резком снижении (на 150-250 ед.) показателей А1 и А2 и повышении или понижении значений показателя А3.

Таким образом, предложенный нами метод оценки показателей гуморального антиэндотоксинового иммунитета позволяет выявить группы риска, провести целенаправленное диагностическое обследование и последующее лечение пациентов, а также оценить эффективность терапии.

В соответствии с полученными результатами мы разработали методические рекомендации, которые в течение ряда лет применяются в практике диагностической и лечебной работы Клинико-Диагностического Общества (КДО).

В течение последних двух лет (1999-2001 г.г.) в клиниках Клинико-Диагностического общества показатели антиэндотоксинового иммунитета были использованы при обследовании 2500 пациентов. О целесообразности применения разработанного нами метода можно судить по частоте выявления пациентов с показателями 10-й группы, то есть, пациентов с очень высокими показателями А1 и А2. Эта группа была определена у 80 пациентов (3,2%). Последующее диагностическое обследование, в том числе в специализированных учреждениях позволило выявить у 72 пациентов из этой группы следующие заболевания (табл.6):

Таблица 6

Заболевания, выявленные у пациентов КДО с показателям 10-й группы антиэндотоксинового иммунитета

Диагноз	Количество случаев
Меланома	3
Аденокарцинома желудка	2
Рак поджелудочной железы	2
Рак молочной железы 1 и 2 степени	4
Рак яичников	3
Аденома гипофиза	3
Фиброаденома молочной железы	3
Острый лейкоз	2
Эндометриоз	11
Цирроз печени	4
Хронический панкреатит в стадии обострения	3
Острый хламидиоз	13
Инфекционный мононуклеоз	1
Туберкулезное инфицирование	4
Заболевания соединительной ткани смешанного генеза, системная красная волчанка, склеродермия	7
Ревматоидный артрит	7
	72

Как видно из табл.6, у 72 пациентов из 10-й группы были выявлены довольно тяжелые заболевания. В 8 случаях окончательный диагноз поставить не удалось, то есть, имели место так называемые заболевания неясной этиологии.

ВЫВОДЫ

1. По значениям показателей гуморального иммунитета к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС E.coli О14 с общим энтеробактериальным антигеном обследованные лица могут быть разделены на 11 групп, из которых лишь одна характеризуется нормальными показателями антиэндотоксинового иммунитета.

2. На предприятиях с экологически неблагоприятными условиями труда у большинстива обследованных показатели гуморального антиэндотоксинового иммунитета отклоняются от нормы в сторону снижения или повышенеия.

3. Группы с измененными показателями антиэндотоксинового иммунитета характеризуются относительным преобладанием определенных патологических процессов.

4. В группах обследованных с одновременным снижением или повышением обоих изученных показателей гуморального антиэндотоксинового иммунитета с повышенной частотой выявляются хронические заболевания желудочно-кишечного тракта, острые пневмонии, вирусные инфекции. У лиц с резким одновременным повышением обоих изученных показателей обнаруживаются коллагенозы и злокачественные новообразования.

5. При выздоровлении показатели гуморального антиэндотоксинового иммунитета нормализуются.

6. Показатели гуморального иммунитета к гликолипиду хемотипа Re и к ЛПС E.coli О14 (ОАЭ) могут быть использованы для оценки состояния здоровья людей и выявления групп риска, выбора тактики диагностического обследования и оценки эффективности лечения различных заболеваний.

Список опубликованных работ

1. Системная эндотоксинемия в патогенезе и прогнозе течения затяжного септичсского эндокардита. Тезисы XXV научно-практической конференции врачей Ульяновской области, посвященной 120-й годовщине со дня рождения В.И.Ленина. Ульяновск, 1990, стр.403-404.

2. Диагностика системной эндотоксинемии. В кн. Актуалъные проблемы общей и частной патологии. M. 1993, стр.7-10. (Соавторы: Н.К.Пермяков, В.А.Анохин и др.)

3. Оценка состояния здоровья человека диaгностической тест-системой "СОИС ИФА". В кн. Актуальные проблемы общей и чаcтной патологии. М. 1993, cтр. 10-14. (Соавторы: Р.У.Хабриев, А.В. Бойченко и др.)

4. Иммуноферментные эндотоксин-тест-системы в оценке неблагоприятных экологических воздействий. В кн. Актуальные проблемы общей и частной патологии. М.1993, стр.14-17. (Соавторы: М.Ю.Яковлев, В.Г.Лиходед и др.)

5. Способ оценки резистентности орraнизма. Патент РФ № 2011993. 1994.

(Соавторы: М.Ю.Яковлев, Р.А.Уразаев и др.)

6. Иммуноморфологическая оценка резервов связывания эндотоксина полиморфноядерными лейкоцитами. Архив патологии, 1995, 2, 4-7. (Соавторы Н.К. Пермяков, Н.В.Лиходед, В.Г.Лиходед, М.Ю.Яковлев).

7. Использование показателей антиэндотоксинового иммунитета для объективной оценки сопротивляемости организма и эффективности терапии. Медицинский журнал России, 1998, 21, стр.139-143. (Соавторы: М.Ю.Яковлев, В.Г.Лиходед и др.)

8. Диагностическая иммуноферментная эндотоксин-тест-система "СОИС-ИФА" в выявлении скрытопротекающей вирусной инфекции у детей. Успехи теоретической и клинической медицины. 1999, вьп.3. (Соавторы: М.М.Галуев, С.А.Майская и др.)

9. Screening endotoxin test system "SOIS-IFА" in differential diagnostics of hidden diseases. Journ.Endotoxin Research, 2000, vol.6, р.26. (Соавторы: M.Yakovlev).

10. Оценка состояния здоровья человека по показателям гуморального

иммунитета к эндотоксину грамотрицательных бакгерий. Актуальные вопросы патологии человека. Материалы Всероссийской научной конференции патологической анатомии, посвященной памяти профессоров И.К. Есиповой и В.Н.Галанкина. 1-2 февраля 2001 г., Издательство Российского университета дружбы народов.

ПЕРЕЧЕНЬ ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В РАБОТЕ СОКРАЩЕНИЙ

Гр- - грамотрицательные бактерии

Гр+ - грамположительные бактерии

КДО - кетодезоксиоктулозоновая кислота (кетодезоксиоктонат)

ЛВП - липопротеины высокой удельной плотности

ЛНГ - лихорадка неясного генеза

ЛИП - липопротеины низкой удельной плотности

ЛПС - липополисахарид

ОАЭ - общий антиген энтеробактерий

ОВРЗ - острые вирусные респираторные заболевания

пял - полиморфноядерные лейкоциты

РЭС - ретикуло-эндотелиальная система

СЭЕ - системная эндотоксинемия

ЭА - эндотоксиновая агрессия

ЭТ - эндотоксин

LBP - белок, связывающий липополисахарид